药物分析之西药分析——细胞色素C活力测定法

文章作者 100test 发表时间 2007:01:06 20:18:17
来源 100Test.Com百考试题网

试剂
　　(1) 磷酸盐缓冲液(0.2mol/L)
　　取磷酸氢二钠71.64g,加水使溶解成1000ml,作为甲液。另取磷酸二氢钠27.60g，加水使溶解成1000ml，作为乙液。取甲液81ml与乙液19ml，混匀，调节pH值至7.3。
　　(2) 磷酸盐缓冲液(0.1mol/L)
　　取磷酸盐缓冲液(0.2mol/L)500ml,加水稀释成1000ml，调节pH值至7.3。
　　(3) 磷酸盐缓冲液(0.02mol/L)
　　取磷酸盐缓冲液 (0.2mol/L) 100ml，加水稀释成1000ml，调节pH值至7.3。
　　(4) 琥珀酸盐溶液
　　取琥珀酸与氢氧化钾各4.72g，加水使溶解成100ml，调节pH值至7.3。
　　(5) 氰化钾溶液 取氰化钾0.65g,加水使溶解成100ml后,用稀硫酸调节pH值至7.3。
　　(6) 去细胞色素C的心悬浮液

　　取磷酸盐缓冲液(0.2mol/L)5ml、琥珀酸盐溶液1.0ml与供试品溶液0.5ml（如系还原型制剂，应加入0.01mol/L铁氰化钾溶液0.05ml），置25ml具塞比色管中,加去细胞色素C的心悬浮液0.5ml与氰化钾溶液1.0ml，加水稀释至10ml，摇匀,以同样的试剂作空白，照分光光度法（附录Ⅳ A），在550nm的波长处附近，间隔0.5nm找出最大吸收波长，并测定吸收度，直至吸收度不再增大为止，作为酶还原吸收度；然后各加连二亚硫酸钠约 5mg，摇匀,放置约10分钟，在上述同一波长处测定吸收度，直至吸收度不再增大为止，作为化学还原吸收度；按下式计算。
　　　　　　　　　　　　酶还原吸收度
　　细胞色素C活力＝───────────×100％
　　　　　　　　　　　化学还原吸收度