药物分析笔记：色谱法

文章作者 100test 发表时间 2007:01:06 20:43:18
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色谱法：是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。分配系数：组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。 K=容量因子：又称质量分配系数，即达到分配平衡后，组分在固定相和流动相中的质量之比。

　　薄层分析法：
　　一般指吸附薄层色谱法，固定相为吸附剂的薄层吸附法。K值越大随展开剂移动的速度越慢。比移徝：在薄层色谱法中，组分的迁移距离( )与展开剂的迁移距离( )之比称为比移值( ) 。
　　 R 最佳范围是0.3-0.5 ，可用范围是0.2-0.8 。
　　吸附剂：吸附薄层色谱法的固定相。常用吸附剂有：硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。
　　硅胶：在105-110 C加热30分，使硅胶吸附力增加，称为活化。具微酸性，适分离酸性中性物质。
　　氧化铝：碱性、中性、酸性。中性用得多。制备薄层板：要求吸附剂涂布均匀表面光滑，使用前检查均匀度。2000版用机械涂布法。活化。
　　吸附剂与展开剂的选择：分离极性较强的组分时，宜选用活性低(活度级别高)的薄层板，以极性强的展开剂展开。
　　反之点样：体积宜在20ul 以下，样径不超过2-3mm ，点间距离为1.5-2.0cm，距底2.0cm 。来源：考试大
　　显色方法：直接喷雾法、浸渍法、压板法。 定性分析方法、纯度检查、定量分析方法(洗脱测定法和直接测定法)。

　　气相色谱法
　　气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。
　　原理：各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。来源：考试大
　　一、基本原理：
　　(一)、基本概念：一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积(用于定量)、峰位(用保留值表示，用于定性)、峰宽(用于衡量柱效)。
　　(1)、保留时间 (tR) ：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。
　　(2)、死时间 (t0)：分配系数为零的组分的保留时间。
　　(3)、相对保留值 (r)：两组分的调整保留值之比。
　　(4)、半峰宽 (Wh/2)：峰高一半处的峰宽。
　　(二)、塔板理论：
　　塔板理论方程式(高斯方程式)：
　　理论塔板式数：
　　理论塔板高度：
　　(三)、速率理论： H=A B/u Cu 影响塔板高度的因素：1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗
　　二、气相色谱仪：
　　(1)、色谱柱：固定相与柱管组成。 填充柱、毛细管柱； 分配柱、吸附柱
　　(2)、固定液：高沸点的液体，操作下为液态。 甲基硅油、聚乙二醇等 选择原则：按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。
　　(3)、载体：化学惰性的多孔性微粒 来源：考试大
　　(4)、毛细管色谱柱：开管型、填充型
　　(5)、检测器：
　　1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕获检测器
　　2、质量型检测器：氢焰离子化检测器 中国药典2000对气相色谱规定：除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意更改外，其他均可适当改变，色谱图于30min内记录完毕。